兽药名称
通用名称:猪圆环病毒2-dCap-ELISA抗体检测试剂盒
商品名称:无
英文名称: Porcine Circovirus 2-dCap-ELISAAb Kit
汉语拼音: Zhu Yuanhuanbingdu 2-dCap-ELISA KangtiJianceshjihe
作用与用途
猪圆环病毒2型(PCV2)是引起断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS) 等疾病的主要病原。本检测试剂盒采用间接ELISA法,包被PCV2重组Cap蛋白,通过HRP标记抗体来检测该病毒的特异性抗体。
本试剂盒可检测猪群中的PCV2抗体,分析猪群阳性率、抗体水平和变异系数,为评估猪群的免疫水平提供有效信息,适用于猪场大规模样本检测。
主要组份与含量
猪圆环病毒2型抗原包被板:5块板
样品稀释液:180mLX1
10倍洗涤液:240mLX1
PCV2 HRP标记抗体:70mLX1
TMB底物液:70mLX1
终止液:40mLX1
阳性对照血清:7mLX1.
阴性对照血清:7mLX1
封板膜:5张
说明书:1份
注意事项
1)试剂盒储存条件 为2-8℃.开启前应确认其批号及有效期。
2)过期产品请勿使用,不同批号的试剂盒组份禁止混用。
3)试剂盒使用前各组份试剂均需恢复至室温(25±3°C) ,使用后放置2-8*C保存。
4》 应注意避免向试剂盒中引入污染。
5)实验所用仪器 (如:微量移液器,恒温培养箱, ELISA洗板机,酶标仪)需要在使用前进行功能检查,确保其可用性、准确
6)所有试剂严禁接触皮肤和粘膜。检测结束后所用耗材需按国家规定进行无害化处理。
7)移液器吸头必须一 次一换。
8) 未用的微孔板条可装入密封袋中2-8°C保存。
9)试剂盒中各组份容 器只针对该组份使用,不可二次利用。
10)仅供兽医诊断使用。
用法与判定
1.试剂准备
1)所有试剂恢复至室温(25±3℃)后使用。
2)1倍洗涤液的配制
10倍洗涤液使用超纯水进行10倍稀释,稀释后的洗涤液在2-8℃可以稳定保存1周。如配制100mL 1倍洗涤液需10mL 10倍洗涤液加90mL超纯水(dH2O)。
2、样品标准
1) 尽量使用新鲜采集的血清样本。
2)不能用于严重污染或严重溶血样本的检测。
3)如果血清祥本浑浊,需离心后取上清进行检测。
4) 检测样品可在2-8℃保存5天,长时间保存需要转移至-20°C或更低温环境中。
3.、样品稀释
样品采用2步法100倍稀释。第-步10倍稀释样品,稀释板中每孔加入90μL样品稀释液,然后每孔加入10μL血清样品,充分混匀;第二步再次10倍稀释,稀释板中每孔加入135μL样品稀释液,然后每孔加入15μL第一步混匀后的样品,充分混匀。禁止稀释阳性对照血清(PC)与阴性对照血清(NC)。
4.操作歩驟
1)将所有組分从試剤盒中取出,在恒温箱(25士3℃)中放置至少6O分中,恢夏至室温。
2)向抗原包被板孔中加入100μL提前在稀释板中稀释后的祥品。
3)向指定孔中分別加入100μL未稀釋的明性対照血清(NC)和旧性対照血清(PC)。
4)盖上封板膜, 室温(25±3℃)下孵育30分狆(±2分钟)。
5)用ELISA洗板机或 微量移液器洗板,弃去孔中液体,毎孔加300uL 1倍洗漆液,洗漆三次。最后一次洗涤后将醇株板在吸水紙上轻轻拍干,平禁各步骤之间孔板出现干燥情况。
6)毎孔加人100μL PCV2 HRP柝記抗体。
7)盖上封板膜, 室温(25±℃)下孵育30分狆(±2分钟)。
8)重夏歩驟5)。
9)毎孔中加入100uL TMB底物液。
10)盖上封板膜,室温(25±3℃)下孵育15分钟(±1分钟)。
11)毎孔中加入50uL終止液, 終止酶促反应。
12)使用450nm波 长测量吸光度值。
13)结果判定与计算。
5、判定
1) 实验成立条件
阳性对照D50m平均值>0.4;
阴性对照Dsorm平均值<0.3;
如果检测结果不在界定范围则需要重新进行检测。
2)计算方法
NC OD均值=(NC1+NC2)/2
PC 0D均值=.(PCI+PC2)/2
3) S/P值计算公式
S/P=(样品0D值-NC OD均值)/(PC 0D均值-NC OD均值)
4)判定标准
阳性:S/P≥0.4
阴性:S/P<0.4